动物实验,心肌缺血,速效救心丸 中国实验动物信息网 2020-09-03 1062

　　背景：冠心病和缺血性心肌病是*重要的心血管疾病类型，现代医学在心血管疾病的治疗上取得了长足的进步。一线治疗，例如抗心绞痛和抗惊厥药是心血管疾病的首选治疗方法。 SX是治疗心脑血管疾病*有效的中成药之一。它用于治疗冠心病，心绞痛和心肌梗塞。已证明小剂量SX可以迅速缓解心绞痛并改善症状，没有明显的症状，副作用或耐药性。*近的研究表明，SX可以显着改善心肌缺血，改善微循环，降低心肌梗塞的发生率，降低血液粘度，增加冠状动脉血流量，扩张冠状血管，已经证明它可以改善心肌的血液供应。在这项研究中，我们使用左前降支（LAD）结扎法制备了心肌缺血模型，并研究了SX对心脏的抗心肌缺血作用。在实验过程中，测量心肌梗塞面积，血气变化，血液动力学和心外膜心电图，血清肌酸激酶同工酶MB水平（CK-MB），乳酸脱氢酶（LDH），丙二醛（MDA） ），超氧化物歧化酶（SOD）等参数。

　　动物：所有的狗都放在实验室条件下，保持在适度的温度和湿度下，可以自由进食。饲养1周后，根据体重和心电图筛选出44只健康犬，随机分为6组：模型组（盐水，1 ml/kg），高剂量组（SX25.60mg/kg） ml/kg），中剂量组（SX，12.80mg/ml/kg），低剂量组（6.40mg/ml/kg），硝酸异山梨酯（ISD0.80mg/ml/kg）和假手术组（正常）。盐水，每毫升1毫升），每组动物的数量为7、7、9、6、7、8。实验中杀死的动物不包括在内。

　　手术准备：本研究使用急性心肌缺血（AMI）实验模型。将狗禁食过夜，并在手术前随意饮用。执行上述开放式胸腔麻醉狗模型。通过静脉注射30 mg/kg戊巴比妥钠对狗进行麻醉，并且可以根据需要添加其他剂量。等温手术台采用无菌技术，将狗的身体保持在恒定温度下。将狗的气管插管并用呼吸机通气。一条聚乙烯导管穿过右颈外静脉插入，进行静脉血气分析和血液样本测试。左股动脉与聚乙烯导管相连，用于动脉血气分析和血压测量。在第五个左肋间间隙执行8-10厘米的开胸手术，并将心脏悬挂在心包支架中。将一根3-5 mm的左旋支冠状动脉（LCX）与原点分开，并在LCX血管周围放置一个超声流量探头以测量冠状动脉血流量（CBF）。分开左前下降（LAD）部分的*和第二对角分支，并以相同的方式进行测量。穿过LAD的双股7.0丝线封闭了两端，并将双丝结扎线切成结扎线。拧紧*个结扎线以将LAD流量减少50％，持续10分钟，然后针刺第二个结扎线以将血液流量减少90％。假狗未经结扎法援署接受相同的手术。将输液管插入十二指肠并用药物治疗。结扎后30分钟，通过输液管向所有狗注射药物或盐水。

　　实验步骤：血流动力学测量：将冠状动脉造影导管从右股动脉插入左心室，并连接到MP150模数转换器。它测量心率（HR），平均动脉压（MAP），左心室收缩压（LVSP），左心室舒张末压（LVEDP）和LVSP的一阶导数的*大值和*小值。另外，将聚乙烯导管插入左股动脉以测量收缩压（SBP），舒张压（DBP）和平均动脉压（MAP）。然后测量CBF。心肌血流量（MBF，毫升/分钟，每100克），公式为： MBF = CBF x 300 /心脏重量。将每个MBF除以平均动脉压（MAP），以计算冠状动脉血管阻力（CVR）。在手术前，手术前和手术后180分钟收集血液动力学数据。

　　心外膜心电图测量：心外膜心电图有30个单极银线电极连接到MP150，并放置在左心室前面。从心外膜前表面的5××6矩阵点记录特征电参数，例如ECG的ST段抬高。所有数据均使用EEG PowerLab系统软件进行分析。在闭塞前，给药前和给药后30、60、90、120和180分钟测量心外膜心电图。 ST段抬高2 mV以上被认为是计算心肌缺血程度和心肌缺血程度的缺血标准。

　　血清酶活性和血气分析：从鼻窦收集血液样本。诊断试剂盒用于测量肌酸激酶同工酶（CK-MB），乳酸脱氢酶（LDH），丙二醛（MDA）和SOD的水平。在添加厌氧肝素的注射器中收集静脉窦血和动脉血，并立即使用血气分析仪进行氧分压（氧分压）和血氧饱和度（SO2）分析。在闭塞前，给药前以及给药后30、60、90、120和180分钟测量所有血液样品。

　　测量梗塞面积。闭合180分钟后，摘除心脏并摘除心房。用生理盐水快速洗涤心室，在-20°C放置30分钟，切成5等份，然后添加1％氯化三苯四唑（TTC）磷酸盐缓冲液10分钟。 TTC染色后，存活心肌被染成红色，坏死心肌仍呈苍白状态。测量缺血和非缺血区域，并使用缺血区域的重量/左心室的总重量x 100％计算每个缺血区域的重量。 结果：SX对梗塞面积的影响：通过分析缺血性心肌梗塞区域，可以目视观察SX对缺血的影响。图1显示了缺血180分钟期间心肌梗塞面积的百分比。缺血后，心肌梗塞面积约为17.84±2.83％，SX浓度为7.33±4.39％（SX低剂量组），6.03±3.13％（SX中剂量组）和5.55±1.72％。当增加时，它继续减少（SX高剂量组）。在ISD组中也观察到了与SX高剂量组相同的效果。 SX处理后，梗塞区域为白色，非梗塞区域为红色，整体白色和红色体征明显改善。模型组和SX管理组之间存在很大差异。

　　SX对心肌缺血的程度和程度的影响：检查心外膜心电图，并在实验过程中比较心肌缺血的程度和程度。在模型组中，Σ-ST从18.85±11.09 mV增加到228.78±122.39 MV，N-ST从0.33±0.52点显着增加到24.67±7.47点。与模型组相比，用SX和ISD治疗后，上述指数在180分钟时明显降低。此外，SX高剂量组治疗后的ΣST和N-ST分别显着降低了69.18％和26.75％。闭合后，心外膜心电图显着改变，st段显着增加。然而，高剂量的SX（25.6 mg/kg）导致心外膜ECG的ST段明显减少。 SX的血流动力学效应：血流动力学监测是测量和描述心血管功能的关键方法之一。因此，研究了SX对血液动力学的影响。结果表明，在闭塞前6组之间无显着差异。与模型组相比，高剂量的SX和ISD导致MAP和LVEDP显着降低。 SX高，中，低剂量组和ISD组在180分钟后LVSP明显降低。在模型组中，CBF和MBF降低，CVR显着增加，但是在SX和ISD管理组中，这一趋势被明显逆转。

　　SX对血清CK-MB，LDH，MDA含量和SOD活性的影响：在急性心肌缺血期间证实了血清心肌酶水平的变化。当前的研究正在研究SX对CK-MB，LDH，MDA和SOD的影响。闭塞90-180分钟后，与模型组相比，所有SX和ISD对照组均显着降低血清CK-MB，LDH和MDA水平，并增加SOD水平。这些结果表明，SX可以抑制脂质过氧化，增加超氧化物歧化酶的产生，并预防心肌缺血。

　　测量SX对血气的影响。血气分析反映了急性心肌缺血期间的氧代谢和氧消耗。表4显示了6组的血气数据。与模型组相比，SX和ISD处理组中的CaO2略有增加，但差异无统计学意义。

　　结论：当前的研究表明SX具有明显的抗缺血性心绞痛作用，并且SX是治疗缺血性心脏病的有效草药。 SX的作用机制可改善血液动力学，扩张冠状动脉并减少心肌需氧量和工作量。