动物实验,金黄色葡萄球菌,绿脓杆菌,肺炎克雷伯杆菌 中国实验动物信息网 2020-09-02 683

　　目的：建立金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌的多重PCR检测方法，为检测实验动物细菌提供快速，灵敏，简便的方法。

　　方法：基于金黄色葡萄球菌nuc基因，假单胞菌LasI基因，肺炎克雷伯菌PhoE基因，细菌通用16SRNA基因设计特异性引物；优化多重PCR引物的浓度和退火温度，特异性和特异性建立灵敏度检测，多重PCR系统。 PCR系统用于验证和检测实验动物的人工感染标本和粪便样品，并将其与传统检测方法进行比较。

　　结果：多重PCR扩增了金黄色葡萄球菌（153bp），铜绿假单胞菌（600bp），肺炎克雷伯菌（368bp）和通用（520bp）的靶条带。多重灵敏度为10 pg，特异性检测未检测到其他细菌的目标条带。建立的多个PCR系统用于检测人工感染标本的不同组合，在粪便76中检出一例铜绿假单胞菌，与常规检测方法的结果一致。

　　结论：本文建立的多重PCR方法具有特异性，敏感性，简便性和速度优势，为快速检测实验动物中的微生物提供了可靠的方法。