动物实验,miR-221 中国实验动物信息网 2020-09-02 568

　　目的：探讨miR-221在过氧化氢（H2O2）诱导的大鼠心肌细胞（H9c2）损伤中的作用及其机制。

　　方法：MTT方法检测各种浓度的H2O2对H9c2细胞的破坏作用，RT-PCR方法检测miR-221的表达。通过Lipofectamine 2000将MiR-221抑制剂和阴性对照转移至H9c2心肌细胞，并在四组中进行实验：正常对照组，模型对照组（H2O2组），阴性对照组（H2O2 +阴性对照组）和正常对照组。抑制组（H2O2 + miR-221抑制剂组）。 MTT法检测细胞活力，a啶橙染色检测细胞凋亡，磷酸酶缺失Bax，Bcl-2和10号染色体，肌腱蛋白同源基因蛋白（PTEN）和p蛋白激酶（AKT）蛋白质印迹法。

　　结果：0、25、50、100、200、400μmol/ LH2O2逐渐增强了对H9c2细胞活力的抑制作用，而200μmol/ LH2O2则适度抑制了细胞活力。被用作。与正常对照组相比，模型对照组和阴性对照组的miR-221表达明显上调（P\u003c0.01），H9c2细胞活力降低（P\u003c0.01）。 细胞凋亡率显着增加（P\u003c0.01），Bax和PTEN表达上调（P\u003c0.01），Bcl-2和p-AKT表达下调（P\u003c0.01）。 P\u003c0.01）。与模型对照组和阴性对照组相比，抑制组中miR-221的表达明显下调（P\u003c0.01），H9c2细胞的活力增加（P\u003c0.01）。 ，细胞凋亡率大大降低（P\u003c0.01）。 PTEN的表达下调（P\u003c0.01），Bcl-2和p-AKT的表达上调（P\u003c0.01）。

　　结论：miR-221的低表达可以显着抑制H2O2诱导的对H9c2心肌细胞的氧化应激损伤。它与PTEN/AKT信号通路的调节有关。