背景简介：

　　甲状腺相关眼病是成人最常见的眼眶病之一，与甲状腺自身 免疫异常密切相关。眼外肌功能障碍导致的视 物重影是 TAO 较为常见的临床表现之一，对患者 生活质量影响较大，通常发生于疾病后期及眼眶减 压术后。TAO 的发病机制尚不明确，就目前研 究结果来看，眼眶成纤维细胞是患者眼眶内病理改变的基础。

　　原代分离制备流程：

　　采用组织块贴壁法，即指把完整的人眼眶组织剪碎成组织块在培养瓶底均匀分布，置于孵箱中孵育5-8h后，待组织快边缘自然干燥后就会紧密贴于瓶底，加入培养基培养。

　　1、取材后放入培养皿中,于显微镜下尽量剔除脂肪组织和较大的血管,保留结缔组织。

　　2、用D-PBS缓冲液液将组织块反复冲洗3次,再用眼科剪将其剪成1mm3左右的小组织块。

　　3、用吸管将剪好的小块按5mm间距,均匀的贴在瓶底，放入37℃,CO2培养箱内静置。

　　4、5-7h后,待组织小块稍干并紧贴瓶底时，在培养瓶中缓慢加入适量含FBS的DMEM培养液，放入培养箱中培养。

　　结果展示