颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞‚其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾 体激素分泌等卵巢功能活动。环境中有毒有害物质对人和哺乳动物的生殖毒害和机制至今仍在探索中，颗粒细胞体外培养是研究化学毒物生殖毒性的基础‚ 是探索卵巢内分泌功能及调控机制的重要手段‚而如何 获得高质量的颗粒细胞是生殖毒理学研究深入的关键。

　　原代分离制备流程：

　　1、先给大鼠皮下注射孕马血清激素作用48h后

　　2、将大鼠脱臼而死，75%酒精浸泡4-6min

　　3、从背部进行解剖，取双侧卵巢。取出卵巢，用剪刀刺破卵泡，用镊子将颗粒挤压出来，也可以直接用剪刀剪碎卵泡，使大量颗粒暴露出来。

　　5、将卵巢颗粒放入配好的DMEM+双抗中

　　6、200目过筛

　　7、收集悬液，离心1000rpm，5-15min

　　8、采用DMEM+20%FBS+双抗培养基重悬沉淀

　　9、调整接种到12孔板培养

　　结果展示