动物造模,药效评价,前列腺增生 z-bio 2024-11-18 1589

　　1.造模材料  动物：成年雄性近交系BALB/c小鼠，孕16～18天的近交系BALB/c小鼠；药物：尿生殖窦间质，青霉素，链霉素，D- Hank液，胰蛋白酶，小牛血清培养液，乙醚。

　　2.造模方法  UGM的制备：孕16～18天的近交系BALB/c小鼠经脱颈离断处死，取出胚胎，在含在青霉素和链霉素的0～4℃ D-Hank液中，于立体显微镜下微解剖，修剪掉胚胎膀胱，Wolffian和Mul-lerian管，剩下完整的尿生殖窦(urogenital sinus, UGS)。将 UGS置入1％的胰蛋白酶溶液中，4℃，消化120min，以去掉上皮成分保留UGM。用含50％的小牛血清培养液清洗，终止胰蛋白酶的消化作用。制备好的UGM保存于D-Hank培养液中，3h内使用。整个操作过程均在无菌条件下进行。

　　动物接种：将动物随机分为：正常对照组，假手术组，UGM种植组。乙醚吸入麻醉，妥善将鼠固定于操作台。腹正中切开，暴露膀胱及腹侧前列腺，将制备好的UGM种植于腹侧前列腺内。假手术组除不种植UGM外，余步骤同上。

　　3.造模原理  用鼠胚胎UGM诱导鼠前列腺增生，建立良性前列腺增生动物模型。

　　4.造模后的变化  UGM种植组与对照及假手术组相比，前列腺湿重明显增加。对照及假手术组病理表现基本相同，腺上皮呈单层低柱状，较小乳头状突起。腺体显管状，腺腔内少许分泌物，纤维间质较少。UGM种植组腺体及纤维组织增生，以腺体增生为主，腺腔圆形，腺上皮高柱状，有增生，形成较多乳头凸入腔内，腺腔内分泌物增多，纤维间质有增生。

　　5.注意事项  为验证制备的UGM符合本实验要求，将UGM作如下研究：手术显微镜下观察UGM是否残留有Wolffian和Mul-lerian管等附属结构，UGM连续切片，HE染色观察是否残存上皮成分。为进一步证明消化后的UGM无上皮成分并具有活性，将UGM种植于同系雄鼠肾包膜下，四周后切取移植物，作连续切片，HE染色观察。