1.造模材料 动物:健康成年大鼠,雌雄不计;药物:人血液,生理盐水,50:50的酒精和干冰合剂,蒸馏水,铁氰化钾,Dowex 50-8。
2.造模方法 取血库中放置过久的人血液,不计血型,离心分离,去掉血浆和白细胞,把红细胞用等量生理盐水清洗3次,离心后盛于容器中冷冻后,溶于3倍的50:50的酒精和干冰合剂中,加入半量蒸馏水混合,这样的溶液中含16%~18%的血红蛋白,血红蛋白的浓度可在分光光度计上测定。不需灭菌消毒贮存于冷冻情况下备用。实验时将冷冻的血红蛋白融化,把血红蛋白和等量1mol/L的铁氰化钾作用,使之变成变性血红蛋白,并与标准的亚铁血红蛋白标准液对比测定,铁氰化钾超过5%时,才能保证血红蛋白变性,为了去掉过多的钾,可在每5ml血红蛋白液中加Dowex 50-8 1g,经去除钾的变性血红蛋白即可供注射用。
实验动物实验前禁食24~72h,尾静脉注射2g/kg的变性血红蛋白。
3.造模原理 变性血红蛋白引起动物急性肾衰竭。
4.造模后的变化 造模动物表现为呕吐、少尿,口、鼻、眼明显出血。尿素氮和血钾升高,与人类肾衰症状相似。死亡率可达93.5%。组织学可见。肾小管轻度水肿、变性。
造模6~48h为少尿期,肾小管病变明显,肾小管细胞散在性的呈现混浊肿胀,坏死,也有萎缩现象,管腔内有时可见结晶。