动物造模,药效评价,白血病 z-bio 2024-09-04 68

　　【造模机制】bcr/abl转基因小鼠模型：通过克隆分析小鼠Tec基因的启动子序列和功能，发现由 Tec启动子调控的基因仅特异性地表达在造血干细胞的细胞质中。采用小鼠的Tec基因的启动子序列，制备转基因载体，携带白血病相关基因ber/abl，制备转基因动物。转基因小鼠首先出现粒细胞异常增生、高血小板血症，经一定时间后发生骨髓增殖综合征，和人CML极为相似。其中有转基因鼠在出生后即表现为急性白血病，但它们的子代经过一段潜伏期后表现骨髓增生综合征。另外一种转基因小鼠是高表达持续活化的突变Stats，此突变的 stats携带2个突变位点，可以和内源性stat5结合，形成二聚体，持续活化。这种小鼠生长发育过程中发生白血病。还有突变基因敲入(knock-in)模型。如，SHP-2D61G、SHP-2E76K基因敲入小鼠，均发生白血病。

　　【模型特点】利用不同的启动子已建立起几个能模拟人CML的转基因小鼠品系。与反转录病毒转染并移植法建立的CML模型相比，转基因小鼠模型有以下几个优点：①bcr/abl基因作为转基因小鼠的一部分在体内表达，更能精确地模拟人 CML；而反转录病毒转染并移植法建立的CML模型在细胞培养、移植过程受许多细胞因子的影响，这些细胞因子和处理受体鼠的其他因素都对疾病的表型有较大的影响。②bcr/abl转基因鼠可以传代，而反转录病毒转染并移植法建立的CML模型须重新建立。③转基因CML模型有一定的潜伏期，这与人的CML极为相似；而反转录病毒转染并移植法建立的CML模型潜伏期短，不利于人CML发病前机制的研究。④转基因鼠的CML有类似于人CML的单克隆性，而反转录病毒转染并移植鼠的CML是多克隆的。转基因CML也存在一些缺点：①转基因动物的每一个细胞都有bcr/abl基因的表达，而人的CML只在造血干细胞和祖细胞中表达，这或许会影响CML的病理特性和治疗情况；②SHP-2D61G小鼠正常生长发育过程中仅发生髓系增殖病，但辐照后发生白血病及其他肿瘤；③SHP-2E76K是条件性敲入小鼠，胚胎小鼠如果血液系统表达SHP-2E76K突变会导致小鼠胚胎致死，所以仅在小鼠出生后，用Poly I:C诱导血液系统Cre表达，导致小鼠造血干细胞或者祖细胞表达 SHP-2E76K突变蛋白，小鼠发生白血病。

　　【模型评估和应用】由于bcr/abl转基因小鼠模型存在遗传还不够稳定、模仿CML还不够精确等缺点，因此还需要寻找更合适的启动子，探索更便利的转基因动物方法，尝试更近似的动物品种。目前主要用于以下3方面的研究：证实CML是否造血干细胞源性，研究ber/abl基因与其他相关基因对白血病共同影响，治疗药物的筛选。SHP-2D61G及SHP-2E76K敲入小鼠是很好的白血病动物模型，但需要商品化。