动物造模,药效评价,Lieber-Decarli模型 z-bio 2024-09-02 49

　　(1)复制方法  给大鼠每日仅喂食含全营养素和酒精的液体食料。该食料是按热量配制的，其中，蛋白质18％、脂肪21％、糖类47％(其中36％的热量由酒精代替)，还有一些维生素和无机盐等。4周后，抽取全血制备血清作血清生化检测，摘取肝脏作组织形态学检查。或在使用酒精液体食料的基础上，加入一定量的吡唑，或在喂养乙醇液体食料的同时，静脉注入内毒素，数周后同上进行生化和病理检查。

　　(2)模型特点  同窝大鼠每日配对喂食含全营养素和乙醇的液体食料，4周后出现明显的肝脏脂肪变性，但未出现酒精性肝炎及纤维组织增生。给大鼠喂养加入吡唑(2mmol/L)的乙醇液体食料，12周后除出现肝脏脂肪变性、单核细胞浸润、肝细胞坏死外，尚可见肝脏中心静脉肥厚，周围细胞严重气球样变，中心静脉和肝细胞周围纤维化等，病变以酒精性肝炎为主。在喂养乙醇液体食料后尾静脉注入内毒素2mg/kg体重，大鼠除出现酒精性肝炎病理改变外，还呈现出补体的活化、血小板功能亢进及微循环障碍等肝外表现。

　　(3)比较医学  毫无疑问，酒精性肝病的发生与发展与机体摄入乙醇的浓度、剂量和周期密切相关。采用大鼠复制酒精性肝病实验动物模型，其关键问题主要是解决大鼠厌恶乙醇及长期摄取乙醇而可能引起的营养障碍等问题。使用 Lieber-Decarli等发明的含全营养素和乙醇的液体食料喂养大鼠，不仅可以维持其长期摄取足量乙醇，保持血中较高的乙醇浓度，而且提供了足量的全营养紊而保证大鼠处于良好的营养状态。研究证实，酒精性脂肪肝的严重程度与液体食料中脂肪的含量相关，25％热量的脂肪是液体食料中脂肪比例的最低限。因为食物脂肪是酒精性脂肪肝中蓄积的三酰甘油的重要来源。吡唑是一种酒精脱氢酶(ADH)抑制剂。当将其和酒精同时给动物灌注后，吡唑可以抑制ADH代谢系统，加强非ADH系统代谢，且经后者途径产生的乙醛代谢较前者的慢，从而增高的乙醛可抑制肝细胞的微管组合及蛋白质的分泌，导致肝细胞坏死，以此来造成较严重的或者是接近于人酒精性肝损伤的动物模型。至于吡唑在该模型中适宜剂量的研究，至今尚未见有报道。人类酒精性肝炎或酒精性肝硬变时常伴有内毒素血症。给大鼠喂养乙醇液体食料后静脉注入内毒素，其肝脏组织病理改变和肝外特征与临床表现有许多相似的地方，是研究酒精性肝病内毒素血症的较好模型。事实上，目前有研究者将Lieber-Decarli模型的实验动物对象改成狒狒。液体食料按热量配制为：蛋白质18％、脂肪21％，碳水化合物61％(其中的50％热量由乙醇代替)。由于狒狒好酒，喂养该液体食料1～3年，其中的1/3动物发生酒精性肝硬变。虽然该模型与人类酒精性肝硬变极为相似，但由于实验动物昂贵，实验周期长，所以很难予以推广应用。至今，尚未在国内见有应用的报道。