动物造模,药效评价,肾炎模 z-bio 2024-08-20 67

　　1.造模材料  动物：雄性NHC大鼠，体重150～200g；药物：异戊巴比妥，完全弗氏佐剂。

　　2.造模方法  动物异戊巴比妥麻醉后剖腹，自胸主动脉插入导管，切断门静脉，用冷盐水充分灌洗至肾色转白。取出两侧肾，分离出肾皮质切成细块，用玻璃瓶底挤压，通过150目金属筛的肾皮质匀浆，加约4倍量的生理盐水充分混合后，离心沉淀10min，其上清液再次离心，取第2次离心沉淀后的上清液，经78680×g超速离心45min，弃去上清液，将沉淀物加蒸馏水混合，洗涤3次，超速离心，连续操作数次。把最后1次的沉淀物减压冰冻干燥后，贮存于冰盒中，供实验用。

　　将造模动物饲养在代谢笼中，注射抗原前，先观察1周，每天检查尿蛋白，以尿中无蛋白及无病态的动物作为合格。每只动物用同种抗原性物质(4mg)干重，与完全弗氏佐剂0.2～0.4ml做成乳剂，注入足跖部，只注射1次。

　　3.造模原理  同种免疫复合物诱发动物肾炎模型。

　　4.造模后的变化  注射第5～12周，先后出现蛋白尿，但尿蛋白排出量不高，多在10～20mg/24h，没超过30mg的，持续时间长则4～5个月，短则1～2个月，注射肾抗原后第30周，动物不存在蛋白尿。

　　光镜检查，肾小球毛细管壁局部肥厚，管腔部分狭小，肾小管上皮部分退变，间质无明显变化。电镜见GBM中间有散在局限性不规则膨大部或结节状隆起，不易划分致密层和稀疏层的界限，偶有GBM上皮下电子密性免疫复合物沉着。