目的:观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏卵中的表达及肉芽肿的形成,并进行免疫定位。
方法:将新西兰白兔感染鼠伤寒沙门氏菌尾巴c,收集未感染组,29dpi组和45dpi组的肝脏,并通过Trizol法提取各组的总RNA。用Taqman探针qRT-PCR检测Sjp40 mRNA的表达,提取各组的总肝蛋白,并检测抗Sjp40-McAb9G7和抗弓形虫tSAG1-McAbY3A8(对照抗体)。 Westernblot检测Sjp40蛋白的表达。准备肝石蜡切片,通过HE染色观察肝卵肉芽肿的形成和发展,并使用免疫荧光技术将Sjp40进一步置于卵和肉芽肿组织的肝沉积上。
结果:45dpi的日本血吸虫感染的急性肝肉芽肿病灶的肝脏沉积卵中Sjp40 mRNA的水平在29dpi时显着高于没有卵肉芽肿结节的未成熟肝卵。 u003c0.05)。 Westernbblot证实Sjp40蛋白在29和45 dpi时在兔肝中表达。免疫荧光显示,在29 dpi时,未成熟的兔肝卵中Sjp40的含量为45 dpi,但在45 dpi时,许多成熟卵沉积在含有毛状体的受感染兔肝中。在肉芽肿组织中看到清晰的荧光。
结论:卵的成熟显着增加了血吸虫病感染家兔肝脏中沉积的卵中Sjp40的转录水平。在感染兔的急性肉芽肿性病变(45 dpi)期间,卵子扩散到周围的肉芽肿组织。