动物造模,结肠癌,药效评价 中国实验动物信息网 2024-11-08 1102

　　目的 观察荷瘤小鼠肿瘤浸润免疫细胞在肿瘤发展过程中的动态变化。

　　方法 将小鼠结肠癌MC38细胞移植到24只C57BL/6J小鼠皮下，荷瘤后每周一次记录小鼠体质量及肿瘤大小的变化，每周一次采用流式细胞术检测肿瘤浸润免疫细胞水平，包括 CD45+细胞、CD3+ T 细胞、CD8+ T 细胞、CD4+ T细胞、自然杀伤（natural killer，NK）细胞、树突状细胞、巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨 噬 细 胞 、 髓 源 抑 制 细 胞 （myeloid-derived suppressor cells， MDSC）、 单 核 样 髓 源 抑 制 细 胞（monocytic-MDSC，M-MDSC）、粒样髓源抑制细胞（granulocytic-MDSC，M-MDSC），共检测 4 周。

　　结果 随着小鼠结肠癌肿瘤的增长，CD45+细胞水平总体表现出下降趋势，CD8+ T细胞水平稳步下降至不可逆的水平，而CD4+ T细胞比例在荷瘤早期迅速增长，单位体积中浸润细胞数增长了近8倍，肿瘤浸润的T细胞几乎为CD4+表型。以NK细胞为代表的非特异性免疫应答水平持续下降，而树突状细胞在肿瘤内持续累积，并通过激活精氨酸酶 1（Arginase-1，ARG1）和诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthetase，iNOS），进一步加深免疫抑制作用。巨噬细胞浸润水平整体无显著变化，但Ⅰ型巨噬细胞浸润细胞数的下滑速度显著高于Ⅱ型。单位体积肿瘤内MDSC数未出现下降趋

　　势，在肿瘤内持续累积；其中G-MDSC浸润水平呈稳降趋势，M-MDSC浸润水平持续上升，且占比远高于G-MDSC。

　　结论 小鼠移植MC38结肠癌细胞后，肿瘤组织内免疫细胞浸润水平整体下降，促肿瘤免疫逐渐占据主导地位，从而促进结肠癌的发展。肿瘤内产生了Th1/Th2漂移现象，特异性和非特异性免疫应答水平均显著降低，浸润的单核细胞和粒细胞主要是Ly6C+表型。肿瘤相关树突状细胞和巨噬细胞发挥了重要的免疫抑制作用，CD4+ T细胞和M-MDSC可能是发挥促肿瘤免疫效应的关键点。