动物实验,-荧光定量PCR 中国实验动物信息网 2020-08-21 861

　　目的：比较猕猴肝组织，上皮组织，睾丸组织，心肌组织，肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶（XDH/XO）mRNA的相对表达，采用荧光定量PCR和半定量PCR进行比较,完善实验研究的方法论以提供参考。

　　方法：使用相同的引物序列和内部参考基因，从健康猴子的新鲜肝脏组织，上皮组织，睾丸组织，心肌组织和肾脏组织中提取总RNA，分别进行荧光定量PCR和半定量测定。通过PCR进行相对定量检测。结果执行比较分析。

　　结果：两种检测方法均可检测健康猕猴的新鲜肝脏组织，上皮组织，睾丸组织，心肌组织，肾脏组织中XDH/XO mRNA的表达，并且荧光定量PCR灵敏度在肝组织中为0.4、半定量PCR的灵敏度可以检测出肝脏组织总RNA的15.625ng中XDH/XO mRNA的表达，荧光定量PCR的灵敏度是半定量PCR的39倍。两种方法的检测结果均表明，恒河猴不同组织中XDH/XO mRNA的表达在肝组织中*高表达。荧光和半定量PCR在其他低表达水平的组织中产生不同的结果。

　　结论：两种方法均可用于检测肝组织，上皮组织，睾丸组织，心肌组织和猕猴组织中黄嘌呤氧化酶脱氢酶（XDH/XO）mRNA的相对表达，荧光实时定量PCR的灵敏度高于半定量PCR方法。