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实验小鼠肝脏组织石蜡切片如何操作?

  取实验小鼠新鲜肝脏时要甲醛灌注,甲醛能固定一般组织,但溶解肝糖和色素。

  1.材料必须新鲜,搁置时间过久则产生蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋生,而不能反映组织活体时的形态结构。

  2.固定液的种类很多,其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同。例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪,甲醛能固定一般组织,但溶解肝糖和色素。固定液可分为单一固定液及混合固定液。前者有甲醛(蚁醛、福尔马林)、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、锇酸(四氧化锇)、重铬酸钾及苦味酸等,单一固定液不能固定细胞中的所有成分;混合固定液可以互补不足,常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液、FAA液、Carnoy氏液、SuSa液(配方见有关技术书籍)。

  小鼠肝脏组织石蜡切片操作过程:

  1.取材

  2.固定

  3.洗涤与脱水

  4.透明

  5.浸蜡与包埋

  6.切片

  7.贴片与烤片

  8.切片脱蜡及水化

  9.染色

  10.切片脱水、透明和封片

  切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度。通常切片厚度为4~7微米,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上。

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