动物模型,惊厥 中国实验动物信息网 2020-08-12 1485

　　(一)戊四氮致惊厥模型

　　1.造模材料  动物：昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄兼用，或大鼠；药物：戊四氮(pentetrazole, PTZ)。

　　2.造模方法  造模组小鼠腹腔注射戊四氮90mg/kg。对照组等量注射生理盐水。或大鼠肌内注射戊四氮112mg/kg，或皮下注射110mg/kg，以全身阵挛性惊厥为指标，一般给戊四氮后观察60min。

　　3.造模原理  戊四氮主要作用于脑干及大脑，使兴奋性突触的易化过程增强而引起惊厥发作。在阈剂量时，能使动物发生阵挛性抽搐，是常用的致惊厥剂。

　　4.造模后的变化  以后肢伸直为指标，可观察到小鼠发生惊厥(大发作)，阵挛潜伏期为(17.3±7.6)s。

　　5.注意事项  本实验与动物品系有关，不同种系小鼠持续惊厥后死亡发生率差异较大，实验时应予注意；部分动物在阵挛性惊厥后，可发生强直性惊厥以至死亡。

　　(二)戊四氮慢性点燃大鼠惊厥模型

　　1.造模材料  动物：SD雄性大鼠，体重(200±20)g；药物：戊四氮。

　　2.造模方法  SD雄性大鼠，体重(200±20)g，隔天一次腹腔注射PTZ 35mg/kg，持续28天，停药1周后，用相同剂量PTZ测试。

　　3.造模原理  戊四氮兴奋脑干嘴侧区及大脑导致动物惊厥。

　　4.造模后的变化  造模后，凡显示连续5次2级以上惊厥的大鼠为点燃大鼠。大鼠惊厥行为评分标准：0级，没有行为上的发作；1级，节律性点头或头部颤搐；2级，阵挛性咀嚼；3级，头部颤搐加前肢阵挛性抽搐；4级，袋鼠姿势(上身直立)；5级，跌倒；6级，强直性惊厥。

　　(三)士的宁致小鼠惊厥模型

　　1.造模材料  动物：昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄兼用；药物：硝酸士的宁注射液。

　　2.造模方法  造模组小鼠腹腔注射硝酸士的宁注射液1.5mg/kg。对照组注射等量生理盐水。

　　3.造模原理  士的宁是脊髓抑制性神经元甘氨酸受体的拮抗剂，可选择性的兴奋脊髓，大剂量腹腔注射使动物产生癫痫样强直性惊厥。

　　4.造模后的变化  造模后可观察到小鼠发生强直性惊厥，潜伏期(5.1±1.0)min，惊厥率100％，死亡时间(6.8±2.6)min，死亡率100％。

　　(四)电刺激导致小鼠惊厥模型

　　1.造模材料  动物：昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄兼用；器械：YSD-5型药理、生理实验多用仪。

　　2.造模方法  取小鼠用YSD-5型药理生理实验多用仪进行电刺激。刺激方式：单次；间隔：300ms；电压调节旋钮固定在7.5格(100V)。以后肢发生强直性惊厥为合格。

　　3.造模原理  电刺激导致小鼠惊厥。

　　4.造模后的变化  电刺激后动物发生强直性惊厥。

　　(五)发育期大鼠高热惊厥模型

　　1.造模材料  动物：21天龄SD大鼠，体重60～100g，雌雄兼用；器械：热水浴。

　　2.造模方法  热水浴箱内(44.5℃)的水深以大鼠沿箱壁站立时仅露出头部为准，大鼠在水中5min如不惊厥则取出，5min内发生惊厥者则惊厥开始时即取出。隔日诱导惊厥1次，共诱导10次，末次诱导后24h处死大鼠。

　　3.造模原理  采用热水浴诱导大鼠高热惊厥。

　　4.造模后的变化  HE染色结果：正常对照组大鼠海马CA1区、CA2区细胞排列整齐、极向好、染色均匀，细胞核大小一致、长椭圆形。造模组大鼠海马CA1区、CA2区细胞排列紊乱、极向不清、细胞空泡变，细胞核大小不一致、呈圆形或椭圆形。

　　大鼠海马CA1区及门区神经元超微结构改变：正常对照组大鼠海马CA1区及门区神经元细胞规则，基质均匀，线粒体呈椭圆形，大小正常，嵴规则，粗面内质网及核糖体结构清楚，核膜平滑，核圆形，常染色体分布均匀，核仁清楚。造模组大鼠海马CA1区及门区神经元线粒体体积小，基质浓缩，嵴模糊不清，甚至消失，有的线粒体出现空泡、畸形，高尔基复合体轻中度扩张，结构不清。

　　(六)听源性致惊厥模型

　　1.造模材料  动物：大鼠，雌雄兼用；器械：隔音箱，电铃。

　　2.造模方法  选用听源性发作敏感的大鼠，以电铃刺激60s(或90s)能产生奔跑或惊厥者为实验对象。以后每天以相同条件刺激一次，连续3～5天，反应恒定者作为模型用于实验。

　　3.造模原理  强烈的铃声刺激，造成听觉中枢过度兴奋，而后扩散到邻近的运动中枢，使某些敏感动物产生一种定型的运动性发作。

　　4.造模后的变化  电铃刺激时动物出现惊厥。

　　5.注意事项  实验前应对试验大鼠对铃声的反应性进行筛选，实验条件必须严格控制，每次刺激控制条件应一致。

　　(七)氨基脲致小鼠惊厥模型

　　1.造模材料  动物：昆明种小鼠，体重(22±2)g，雌雄兼用；药物：氨基脲。

　　2.造模方法  将氨基脲150mg/kg尾静脉注射，注射容积0.01ml/g，注射时间8s。以出现狂奔和后肢强直为惊厥发作。

　　3.造模原理  硫代氨基脲是谷氨酸脱羧酶抑制剂，抑制谷氨酸生成γ-氨基丁酸(gam-ma-aminobutyric acid, GABA)，使GABA合成减少，脑内GABA水平下降可引起惊厥。

　　4.造模后的变化  注射后，造模动物出现狂奔和后肢强直，潜伏期为(49.3±11.6) min，存活时间为(59.3±23.4)min。