动物实验,乙型肝炎 中国实验动物信息网 2020-08-11 883

　　（1）复制方法将2 ml HBV阳性血清静脉接种到2-4 kg的健康猕猴中，并在1-3岁时检测其阴性的HAV，HBV和HCV标志物。接种的HBV阳性血清来自无症状HBV携带者，其HBsAg，HBeAg，抗HBc和HBV-DNA呈强阳性。接种疫苗之前和接种疫苗后第4、8和12周，模型猴在氯胺酮麻醉下进行了肝穿刺和肝切除术。将样品用10％甲醛溶液固定，用于正常组织切片的制备，用HE染色，用光学显微镜观察，并且用透射电子显微镜将肝组织制成超薄切片。请用电子显微镜观察。

　　（2）模型的特征在感染的观察期内，模型猴子没有出现黄疸，厌食，缺乏能量，体重减轻等症状。恒河猴猕猴感染HBV后，没有明显的肝炎症状，急性肝炎病变较轻。在某些模型动物中，ALT暂时升高。用光学显微镜观察时，一些肝组织显示出轻度肝炎病变，肝细胞显示出气球样变化，一些区域略微坏死，小叶边界完好无损。电子显微镜显示大量圆形，管状，完整的乙型肝炎病毒颗粒（Dane颗粒）。感染后1周，丹麦人颗粒显着减少，一些圆形颗粒保留了8周，但没有一个。免疫组织化学检测肝细胞中HBsAg表达，原位杂交检测肝细胞中HBV DNA。 HBsAg在血液中持续阳性持续7-8周。 

     （3）比较医学当HBV进入模型动物的体内时，机体的网状内皮系统，特别是肝脏固定的吞噬细胞（肝巨噬细胞）将HBV从血液循环中清除，并且病毒侵入肝细胞。阻止从体液免疫的角度来看，活化的B细胞产生的抗S1和抗S2抗体可能在早期抗HBV感染中起重要作用。因此，HBV感染模型的成功与模型动物的年龄，体重和免疫系统密切相关。该模型的肝脏组织中的病理变化基本上与人类乙型肝炎相似。除猴子外，高级非灵长类动物（如黑猩猩，长臂猿和羊毛猴）也可以建立人类HBV感染的动物模型。在这些动物中，黑猩猩*敏感，但在道德，经济和实验条件上却难以控制，从而限制了这些更高的灵长类动物HBV感染模型的适用性。