动物造模 中国实验动物信息网 2020-08-07 896

　　（1）复制方法成年大鼠在正常喂养1周后，改为高脂饮食（以低脂饮食为基础添加1％胆固醇和5％猪油），并同时加入60ml乙醇1.5ml/kg体重在实验结束时，每天两次喂胃，连续12周，禁食16小时，收集血液以制备血清，收集肝组织以制备匀浆，对石蜡切片进行生化分析和组织形态学分析。它用于生物学检查。或者，每天喂两次15毫升60％乙醇/ kg体重管，持续3至6个月，同时喂养高脂饮食。或在定期喂奶的同时每天注射白酒，橄榄油和吡唑的混合物。在这种情况下，白酒的摄入量为8-12克/千克体重，随时间增加。所以*周是8克。第2周10g，第3周12g，直到实验结束为止。在*后一次给药后，吡唑的摄入量为每天27.2 mg/kg体重，连续4周每天一次。 24小时后取样，并包埋在常规石蜡和电子显微镜中进行组织学观察。

　　（2）模型的特点是12周高脂饮食和60％乙醇1.5 ml/kg体重的口服管饲，模型大鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST），丙氨酸转氨酶（ALT），胆碱酯酶（ ChE），三酰基甘油（TG），丙二醛（MDA）和肝组织MDA增加，血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和肝组织超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽谷胱甘肽（GSH）降低在显微镜下，肝细胞看起来明显肿胀，胞浆状和气球状。细胞质还包含各种大小和数量的脂质液滴液泡和Mallory（酒精性玻璃状）。变性）局部坏死，基质中炎性细胞浸润。高脂饮食和管饲15％60 ml乙醇/ kg体重，持续3个月，模型动物肝组织中显示轻度至中度脂肪变性，脂肪储存细胞和a-平滑肌动蛋白（a-SMA）阳性细胞随着肝细胞癌数目的增加，在1个月时，肝细胞脂肪变性恶化，α-SMA阳性细胞增加，并且可见中心静脉和鼻腔纤维化。每日饮食，搭配4周的白葡萄酒，橄榄油和吡唑管。在显微镜下，模型动物肝叶的中央部分明显坏死，或局灶性坏死，或点状坏死，间质中有许多炎性细胞浸润，并且通过电子显微镜观察，核显示出肝脏。不规则，核周空间扩大且异质；细胞质温和，电子密度降低，细胞器数量减少；线粒体肿胀变形，cr消失，异常线粒体数量很多，粗大的囊泡被扩张，破坏和脱粒，主要是大的和小的囊泡；在细胞质中还发现了不同大小和数量的脂质液滴液泡，并且位于细丝中的酒精体储脂细胞是活跃的并且在它们之中是独特的。脂滴的液泡被减少或消除。在窦和肝细胞周围发现增殖的胶原纤维。 （3）比较医学酒精性肝病包括酒精性脂肪肝，酒精性肝炎，酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化。这些类型的病变是进行性的，可能会部分重叠。乙醇从消化道吸收后，大部分（90％或更多）被酒精脱氢酶（ADH）和一些微粒体酶（微粒体氧化系统）氧化并在肝脏中代谢。乙醇的主要代谢产物是乙醛，对肝脏和其他器官有毒。临床上，不同的生化指标从不同方面全面衡量肝细胞损伤程度（ALT，AST），储备量（ChE）和代谢功能（TBIL，TP，ALB，TG）。这可以反映出来，并且在某种程度上，组织形态学检查是区分酒精性肝病不同阶段的*直接证据。马洛体几乎不含有脂肪，是由肿胀的肝细胞（酒精性肝病的一种特定病灶）中的一些细胞质纤维蛋白沉积引起的。此外，在肝的腺泡中央区域可以看到肝窦和肝细胞周围的结缔组织，胶原纤维在窦窦内皮下形成连续的膜状结构。我会。在脂肪肝发展为肝硬化的过渡过程中，发现了具有扩散性炎症细胞浸润和坏死的酒精性肝炎。炎性细胞浸润和脂肪肝是其特征性病变。上述动物模型的生化指标和肝组织形态学检查基本符合人类酒精性肝病的特征，是目前中国使用的主要建模方法。其中，在酒精性肝病中，12周高脂饮食和60％乙醇1.5 ml/kg体重管饲法与脂肪肝相似，但高脂饮食和60％乙醇15 ml/kg体重管饲法6个月喂养模型或4周管饲常规饮食中的白葡萄酒，橄榄油和吡唑与酒精性肝纤维化的病理变化更为相似。但是，对于酒精性肝纤维化模型（可通过管饲法复制），前者的形成率低且不典型。