动物模型,IBS 中国实验动物信息网 2020-08-07 1137

　　（1）复制方法每天一次在体重为120-150 g的两周龄大鼠中于0-4°C口服2 ml生理盐水，连续14天。 14天后，停止管饲并正常喂养。在用冰水灌胃28天后的3小时和3至24小时内收集粪便，计算粪便的数量，用电子天平称量湿重，并在微波炉中烘烤8分钟后干燥。称重并计算粪便的水分含量。水分含量＝ [（干重-干重）/湿重]×100％。然后将大鼠放在大鼠固定器中，在那里可以观察到腹部的收缩反射，并且将带有气球的石蜡油涂层尿道导管插入肛门。气球的末端距离肛门1厘米。通过在扁平肛门的外侧边缘打一个结，将尿道导管固定在大鼠的尾巴上，距离同样为2 cm。 15分钟后，当大鼠适应环境并保持安静时，将26-28°C的盐水通过导管的外部开口注入球囊，这是导致大鼠腹部收缩反射的*小量的水。将被记录。注入水并以15分钟的间隔扩张3次，在三个扩张中测得的*小体积阈值的平均值为大鼠直肠扩张引起的腹部收缩反射的*小体积阈值。 ..测量阈值后的第二天，使用引起大鼠和直肠球的腹收缩反射的*小体积阈值在30分钟内，在3分钟内注水量分别为1.0 ml，1.5 ml和2.0 ml大鼠腹部收缩反射。定期测量。当囊以不同体积扩张时，在3分钟内大鼠腹部收缩反射的次数用于评估大鼠对直肠扩张刺激的敏感性。直肠球囊扩张完成后一小时，处死动物，离肛门3cm的回盲区和距结肠0.5cm的结肠，并用盐水洗涤。用10％甲醛溶液校正，常规石蜡包埋切片，HE染色，并通过光学显微镜，枚举回盲和结肠肥大细胞（MC）观察兔组织形态学变化，兔抗5 ：稀释100次。 5-羟色胺（5-HT），P物质（SP），血管活性肠肽（VIP），γ-氨基丁酸（GABA），乙酰胆碱酯酶（AchE），酪氨酸羟化酶（TH）抗体，用于用SABC标记使用计算机病理图像分析系统和免疫组织化学方法对阳性切片中每种抗体的面积和不透明密度（OD）进行半定量分析。

　　（2）模型特征建模开始后1到14天。灌入冰水后3个小时内粪便的数量和含水量显着增加，这通过粪便的增加而显示出来，粪便变得非常柔软和稀薄，其中有些可能呈糊状粪便，在3至24小时内，粪便逐渐从软稠的粪便变为干燥的粪便，粪便的数量和含水量逐渐减少;开始建模后15至28天（停止用冰水强制喂养）），对应于冰水喂养时间的3小时内的粪便数量和含水量与正常动物无明显差异。此外，在3到24小时内，随着实验天数的增加，粪便不仅会变为干燥的粪便，还会伴随粪便。谷物的数量逐渐减少，但粪便的特性逐渐变得干燥而坚硬。肠道敏感性测试的结果表明，模型动物的直肠球囊在1.0 ml的低体积膨胀下会在3分钟内显着减少腹部收缩反射的次数，而1.5 ml和2.0 ml的体积会减少。我们显示，扩张时腹部收缩反射的数量没有明显改变。此外，对模型动物的胃，回盲区和结肠的形态学检查未显示任何明显的异常病理变化，但在回盲区和结肠的肌肉层中5-HT阳性。单元格面积（即，单元格数量）已增加。表达的不透明度增加，VIP表达的阳性面积和不透明度增加，GABA表达的不透明度降低，并且不显着改变AchE和TH表达的阳性面积和不透明度.. （3）比较医学大多数IBS患者对一种或多种食物不耐受，并且在进食后会诱发和加剧症状。饮食性IBS可能与患者对压力饮食，腹胀，腹胀和餐后过敏的敏感性增加有关。冷饮刺激是人中IBS的相对公认的危险因素。用冰水管饲可能会诱导大鼠IBS模型。通过连续14天用冰水管饲，该方法可减少大便数量并减少大鼠的水分含量。停止管饲刺激后，这种趋势持续存在并保持稳定。该模型的主要特征是异常排便，类似于便秘的IBS。用冰水管饲后，大鼠腹部收缩反射的*小体积阈值趋于增加。在低容量（1ml）扩张期间，腹部收缩反射的次数显着少于正常对照组，表明它刺激了直肠球囊扩张。灵敏度会降低。这与IBS便秘患者的临床状况一致，这些患者的初始感觉，疼痛和排便阈值明显高于正常人。该IBS模型不仅显示出肠道运动性和敏感性的改变，而且还显着增加回盲区，结肠肥大细胞（MC）和5-HT阳性内分泌细胞，释放MC和5-HT是过量的并且是相应的受体肠道的过度激活是肠道致敏的外围机制。