动物造模,肾功能衰竭模型 中国实验动物信息网 2021-03-26 1067

　　1.根治性肾切除术（1）复制方法将体重约250 g的成年大鼠通过腹腔注射30 mg/kg体重的戊巴比妥钠麻醉。麻醉后，将大鼠固定在背部并准备腹腔。消毒，沿左腹旁切口切开皮肤，暴露左肾，切开胶囊的上下两极，用上下两极切除肾脏的三分之一、并使用明胶海绵。压迫伤口以止血，用普通钠冲洗并通过常规手术缝合。肌肉层和皮肤封闭腹腔。一周后，以相同的方式麻醉大鼠，固定其背部，并沿右腹切口切开皮肤以暴露右肾。结扎肾蒂后，切除右肾。缝合切口，并通过常规手术封闭腹腔。在建模之前和之后，将模型大鼠置于代谢笼中，并收集尿液24小时以测定24小时蛋白质定量。在实验的指定时间采集静脉血样，以测量血肌酐（SCr）和血尿素氮。 （BUN）；麻醉后，将动物处死并通过血液采样进行收集。将动物的残余肾组织标本固定在固定剂中，包埋在石蜡中，制备常规组织切片，用HE染色，并用光学显微镜观察。

　　（2）手术后模型的特点是大鼠伤口没有出血或感染，但体重明显减轻，活动和食物摄入减少，头发松散。造模后一周，该动物可能患有蛋白尿，血清尿素氮，肌酐和24小时尿蛋白逐渐升高。手术后六周，模型动物进入肾功能的补偿期，身体出现电解质失衡和贫血（RBC，HGB和HGT降低，耳和尾巴苍白），血压升高。血压在8周内达到了肾性高血压的标准。模型中的血清尿素氮，肌酐，24小时尿蛋白和血压显着增加。一组动物在手术后10周。 140mmHg可以达到13.7kPa以上。显微镜下的组织病理学观察显示，肾小球肾小球毛细血管扩张，肾小球细胞肥大与足突水肿和融合，肾小球中度至重度肾小球系膜增生和局灶性节段有关，表现为肾小球变性和硬化，并显示肾小球单核淋巴细胞浸润。肾小管间质。

　　（3）比较医学大多数肾脏切除术后，肾单位都有血流动力学变化，导致剩余肾单位中的蛋白尿过滤，*终损害肾小球并引起肾小球硬化，肾小球，主要特征是硬化性CRF。该模型以肾功能衰竭肾小球滤过理论为基础，具有肾小球肥大和硬化的特点，其性能接近临床实际，制备方法简单易行，稳定性和重复性好。 ，应用范围广泛。但是，该模型需要两步手术，容易产生诸如动物的出血和死亡之类的副作用，该模型需要花费很长时间来准备，并且不容易使手术标准化。目前，除5/6肾切除术模型外，大多数CRF肾切除术模型均可使用3/4、4/5和7/8肾切除术创建。但是，各种肾切除术模型在肾功能衰竭的时机，血肌酐，尿素氮，尿蛋白含量的变化以及对肾脏组织的病理损害方面具有独特的特征。该模型在临床CRF（减少肾组织灌注，超滤，抑制肾小球系膜细胞增殖和抗氧化剂）的时机上具有实用价值。

　　2、肾动脉分支结扎和切除方法

　　（1）复制方法将体重200至300 g的成年大鼠腹膜内用30 mg/kg体重的戊巴比妥钠麻醉，并在麻醉后仰卧。沿左腹部切开一个切口，以固定腹部手术区域，定期消毒和脱毛，打开皮肤，进入腹部后暴露左肾，并在手术显微镜下分离肾动脉。保留左肾中的动脉，并结扎其余部分。在所有分支上，通过常规手术缝合切口，并关闭腹腔。两天后，以相同的方式麻醉腹部，右肾门用4-0丝线结扎，取出右肾，并通过手术关闭腹部。在建模之前和之后，将模型大鼠置于代谢笼中，并收集尿液24小时以测定24小时蛋白质定量。在实验的指定时间采集静脉血样，以测量血肌酐（SCr）和血尿素。氮气（BIJN）；麻醉后，通过采血杀死动物，将收集的动物肾脏组织标本用固定剂固定，包埋在石蜡中，制备常规组织切片，用HE染色，然后用光学显微镜染色。观测到的。

　　（2）术后模型特征：大鼠伤口无出血或感染，体重明显减轻，活动和食物摄入减少，头发稀疏和不均匀。模型大鼠术后血肌酐和血压显着升高，可能发生蛋白尿，并结扎肾脏以引起现代代偿性肥大。在显微镜下的组织病理学观察表明，它与大体肾切除术的CRF模型相似。肾小球玻璃体变性和硬化的病理变化。创建此模型的过程与大多数肾切除术相似。结扎后剩余的肾脏大部分为1/6、1/12和1/16、与去除5/6、11/12和15相同。 /肾脏16、

　　（3）比较医学用该方法复制的模型比全肾切除术的CRF模型出血少，但制备方法需要显微外科技术，手术复杂，易学且模型动物，死亡率高。 。术后高血压很严重，肾脏的病理损害也很严重。此模型可用于创建具有不同程度病变的CRF模型以及临床症状，并在使用药物治疗不同程度的CRF时评估药物剂量和疗效。

　　3、冷冻加切除法

　　（1）复制法腹膜内注射戊巴比妥钠30 mg/kg，麻醉体重200-300 g的无蛋白尿成年雄性大鼠的术前测量。麻醉后，将大鼠以俯卧姿势放在手术台上，并定期对背部的手术部位进行消毒和脱毛。切开切口以分离背部左侧的肌肉层，露出左肾。使用左侧。用食指从腹部的相应部位轻轻抬起，肾脏将滑出。在皮肤切口外部，剥去肾筋膜，用冷刀将动物左肾的上下两极以及动物左肾的外部前，后四部分浸入液氮瓶中。冷冻每个区域40秒钟后，将肾脏复位并分层。缝合手术切口。两周后，以相同的方式进行麻醉，结扎肾蒂，并取出右肾。术后6-12周可以建立稳定的CRF模型。对于血液生化测量，在实验中的给定时间采集血液样本，采集左肾组织样本，固定在固定液中，并进行常规组织切片并在光学显微镜下进行检查。

　　（2）手术后没有伤口感染或出血，但体重减轻明显，食物摄入和活动减少，头发变得松散和不均匀。两周后，模型动物的血肌酐和血尿素氮开始增加，表明逐渐发展。血肌酐和血尿素氮在4至6周达到峰值，并保持峰值波动。显微镜下的组织病理学观察显示肾小球肥大，玻璃体变性和硬化以及肾小球系膜基质增生和肥大。 （3）比较医学该模型设计具有较高的手术要求，并且在通过次全肾切除术建立CRF模型时存在出血的缺点。制造方法比全肾切除术的CRF模型更简单，但是对肾脏的冷冻损害程度，例如冷刀在液氮中的时间，冷刀放在肾脏表面的范围，接触面的大小等。将如下。一切都会影响模型中的损伤程度。如果存在差异，则在创建模型时需要统一的标准。该模型可以通过控制冷冻时间来创建不同严重程度的CRF，没有手术过程中的出血风险，但需要特殊的设备来制造并由原位坏死组织诱导免疫力，因此不能排除这种机制。该模型适用于CRF药物治疗和筛选的临床研究。

　　4。电凝和切除（1）复制方法通过腹膜内注射戊巴比妥钠，剂量为30 mg/kg体重，麻醉重约25 g的成年小鼠。麻醉后，鼠标生气并固定。关于定期对手术台背腹部的手术部位进行消毒和脱毛。在背侧的右侧切开一个切口，以暴露右肾。剥下周围的脂肪组织和肾囊形成针头。电灼用于电凝除肺门周围2毫米以外的组织。右肾整个表面的深度约为1毫米。腹部肾脏返回腹腔，并定期缝合肌肉层和皮肤。手术。操作过程控制在大约10分钟内。然后，在12至15天后，以相同的方式进行第二次手术，麻醉，并且在进入腹部后，用丝线结扎左肾门，去除左肾，并关闭腹腔。外科手术。建模过程大约需要18周。在实验的预定时间收集血液样本以进行血液生化测量，采集肾脏组织样本，固定在固定剂中，定期切片并在光学显微镜下检查。

　　（2）模型特征建模后，如果模型动物的伤口没有出血，裂开或感染，通常会在一周内自发愈合。在电灼后的一周内，模型动物在观察期内体重减轻，食物摄入和活动减少，头发松弛，体重增加减慢。建模后2周可能会出现贫血，血液尿素氮和血肌酐升高，血液尿素氮测量值可能比建模前高4倍。随着尿量和尿蛋白含量的增加，模型动物可能具有甲状旁腺功能。过度活跃，例如高血压，低血钙，碱性磷酸酶升高和其他临床症状。电凝肾脏的表面苍白，肿胀并且通过肉眼观察变形。在显微镜下的病理观察显示，在第18周时，模型动物肾脏组织的大部分肾皮质是肾小球结构坏死和萎缩。肾小管消失，肾间质纤维化。 （3）在比较医学中使用电烙术会导致模型动物肾脏的肾皮质坏死，破坏大多数肾小球和肾小管组织结构，并补偿残余肾单位的功能，这是有性别的。 CRF的主要特征是肾小球硬化和肾基质组织的纤维化，*终形成小肾脏。模型易于创建，可以一次大量创建。该模型功能稳定可靠，达到中度至重度CRF水平，模型成功率高，且手术方法出血的可能性较小。或传染性疾病，它具有类似于人类慢性肾衰竭的客观指标。这种方法允许创建相同的大鼠CRF模型，并且比用于索引检测的小鼠抽取更多的血液。该模型适用于CRF药物治疗，筛选和评估的临床研究。