动物造模,肝硬化模型 中国实验动物信息网 2021-03-24 551

　　（1）再生方法成年大鼠通过脐带正中胸骨切开术进行开腹麻醉，并用7-0丝线将肝总胆管缝合在距肝门1cm处。手术后应存放2-8周。在此期间，观察动物的一般活动和身体体征，并动态地从眼眶抽取血液至丙氨酸氨基转移酶（ALT），总胆红素（TBIL），碱性磷酸酶（ALP），透明质酸，并准备血清。 （HA）内容检测。建模完成后，取出肝脏并称重。切割后，收获一部分组织以制备具有羟脯氨酸（Hyp），总蛋白（TP），丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶含量的匀浆。为了进行（SOD）测量，将一部分组织用10％甲醛溶液固定，包埋在常规石蜡中，将切片用HE或Masson染色，一部分组织用1％的4％戊二醛染色。用四氧化固定，并用常规涂料涂覆。埋入618号环氧树脂，切片用超薄切片机制成，并用铀铅染色，并使用光学显微镜和电子显微镜进行组织形态学检查。

　　（2）模型特征建模5周后，肝脏和脾脏的湿重以及模型动物的系数显着增加，血清ALT，TBIL，ALP，肝组织Hyp，MDA增加，并且肝组织TP升高。 ，SOD降低了。光学显微镜显示变性，坏死和炎性细胞浸润，其中模型动物的肝脏组织在手术后1-2天逐渐散布，在第3天变得非常明显。在上述变化的同时，小胆管样上皮细胞出现在门静脉小叶周围，并随着时间的流逝逐渐扩大，拉长和加深，小叶变成花形。在第35天，小的胆管和相关的成纤维细胞，胶原纤维和毛细血管形成了一个膜状空间，该空间将相邻的增生性空间相互连接，围绕并分开，直到形成假小叶为止。在电镜下，手术后1-2天，小叶周围散布着萎缩和变性的单个或2-3个肝细胞，细胞核呈脓性，细胞质稠密，细胞器变性。见坏死和炎性细胞浸润，吞噬积累。在肝细胞变性和坏死的同时，小胆管样上皮细胞在小叶周围出现并增殖，在小泡结构的基侧具有基底膜和胶原纤维层。一两周后，小的胆管样上皮细胞增殖并逐渐形成，沿着肝细胞线从小叶周围延伸到小叶内部。 3周后，胆管样上皮细胞明显分化并进化，其中大多数似乎分化为胆管。上皮细胞变为立方体或扁平状，胞质中间丝增加，核被膜下沉形成不规则形状。染色质在核膜下聚集，管腔扩大，微绒毛稀疏分布。胶原纤维在小胆管周围的增殖逐渐形成胶原纤维的透明层。增生的小胆管及其相关的吞噬细胞，肥大细胞，炎性细胞，成纤维细胞，毛细血管和增生的胶原纤维一起在肝细胞之间形成分隔。一些小的胆管样上皮细胞分化并向肝细胞进化，看到囊泡形式的过渡上皮细胞和肝细胞。它通常包裹在胶原纤维的透明层中，以形成小的肝细胞结节。在8-12周内观察到典型的胶原纤维增生和肝细胞结节。

　　（3）比较医学肝外胆管梗阻引起胆管扩张，胆汁淤积，并在梗阻部位上方的胆管中增加压力，引起肝内胆管扩张和破裂，肝细胞缺血和坏死，并*终可导致肝细胞缺血和坏死。胆汁肝纤维化和肝硬化。胆总管结扎完全阻塞了模型动物的胆管，积聚在胆囊中，积聚在胆囊中，诱导肝脏中自由基的产生，并引起细胞膜脂质过氧化（MDA增加，SOD减少），通透性增加。以及导致和导致的细胞代谢在细胞结构和膜损伤中的失衡。脂质过氧化引起连锁反应，进一步加剧肝细胞损伤和坏死（TP降低）。肝细胞的大量缺血和坏死诱导小胆管样上皮细胞的出现。后者通过一种多能干细胞增殖，并可能具有增殖和分化功能。在肝实质坏死性肝损害的情况下，胆管样小上皮细胞分化为卵泡状或结节性肝细胞，而合成胶原在肝硬化中参与胶原纤维的增殖（Hyp增加），加速形成和发作。该模型可以较好地模拟长期胆汁淤积引起的人肝纤维化和肝硬化的过程和后果，建模方法简单，周期适中，重现性好，成功率高，价格昂贵。目前，除了大鼠外，兔，狗，猴子和其他具有通过胆总管结扎诱发的胆汁性肝硬化模型的动物也已经成功并在国内外广泛使用。