疾病动物模型,青光眼疾病 中国实验动物信息网 2021-03-12 1093

　　青光眼是一组以抑制视神经萎缩和视野缺损为特征的疾病。眼内压升高目前被认为是青光眼的主要危险因素。临床上，降低眼内压被用作青光眼的主要治疗方法。青光眼的病因学和治疗研究进展缓慢，主要原因之一是缺乏理想的动物模型。因此，建立能够模拟人青光眼的视网膜神经节细胞和视神经损伤的动物模型非常重要。

　　[模型化机制]使用各种手段破坏房水返回路径可增加眼内压，并引起视神经变性，凋亡和视神经节细胞的丢失。当今*常用的方法是： （1）将小颗粒或粘性流体的悬浮液注入前房会阻塞小梁组织的房水回流路径。 ②对四肢巩膜表面和周围血管的至少3组静脉进行电凝。引起眼睛的血压升高；③小梁组织的激光变性，阻止房水的回流并增加眼内压。

　　[如何建立模型]

　　1、小鼠6-10周大。腹腔注射用于全身麻醉，而局部眼表麻醉被添加到小鼠中。将聚苯乙烯微球（φ10μm）悬浮在PBS中，使*终浓度为每毫升悬浮液7.2×1000000微球。大约2μl的微球被预先注入。注射后第23天，在一只眼腔内重复注射。每次注射后，使用裂隙灯观察前房和虹膜是否通畅，以及是否有角膜水肿和穿透。*次注射后，每两天用眼压计测量小鼠的眼压。每只小鼠每只眼睛测量6次测量，并以平均值作为当天的眼内压。*次注射后2天内，眼内压可能会增加50％以上，并维持约56天。除了眼内压升高外，它*终还会导致约40％的视神经轴突和神经节细胞（RGC）丢失。

　　2、大鼠和兔子选自6-10周大的动物。在手术前一周，将动物放在安静的地方，避免强光照射。手术方法：腹腔注射麻醉，含25-30 mg/kg的3％戊巴比妥钠。麻醉有效后，将动物固定在手术台上。进行了单眼手术以创建模型。眼内注入0.5％四因子眼药水，沿角膜环切开结膜结膜270°，巩膜表面的静脉分离并暴露，巩膜表面的静脉和角膜环周围的血管至少要凝结3组。用水下凝结器复位球结膜，直到血管组织变白。在假手术对照组中，仅切除了球结膜，而巩膜表面静脉和角膜环周围的周围血管未电凝。将抗菌眼药膏涂在手术眼上。手术后，将动物置于室温下，等待自然醒来。术后5天，每天3次使用抗菌眼药水和抗菌眼药水。眼压测量：在高眼压组和假手术对照组的大鼠眼压在术前，术后1、2、3、4和8周均进行了测量。方法如下。麻醉有效后，腹腔注射25-30 mg/kg的3％戊巴比妥钠，在两只眼睛上涂0.5％丁卡因滴眼液，用眼压计测量眼压，并测量每只眼的记录。 3-5次测量。刚接触或离开角膜的眼压计读数不可靠，应丢弃。

　　3、猕猴模型使用健康的成年猕猴，对雄性和雌性没有任何限制。在创建模型之前，请检查动物眼睛的状况。腔室的角度应该是开放的，视盘应该正常，并且眼内压应该正常。肌注氯胺酮（5 mg/kg）进行麻醉，将0.5％丁卡因滴入结膜囊3次，并使用氩离子激光（带测角镜）将小梁网的1/3部分瞄准1.2-1.5W。能量和光斑直径为50μm。在手术后的前3-5天，光凝在3600范围内100个点并使用1％醋酸泼尼松龙（或相应的抗炎药）需要0.5秒，以减少术后反应。

　　[模型特征]

　　1、小鼠模型的效果更好，不会对眼睛结构或炎症造成明显损害，可以长时间维持高眼压，并可能引起视神经轴突变性和神经节细胞丢失。

　　2、在大鼠和兔子的术后1、2、3、4和8周模型中，将高压眼的眼内压与术前基础压，对侧非手术眼和假手术组进行了比较。差异是显着的和统计学上显着的。意义。术后一周，眼压基本稳定，大鼠眼压为4.1?6.8kPa（30.12?51.18mmHg）。巩膜表面上的至少三组静脉和外周血管的电凝可减少房水的静脉回流，从而导致眼内压的显着且持续的增加。手术眼的炎症反应较轻。

　　3、猴子模型的特征是激光光凝后眼内压急剧下降，房水流量减少。原因可能是炎症反应和对睫状体的损害。需要多次激光光凝以提高模型的成功率。

　　[模型评估与应用]该模型的病理变化主要是在小梁网状组织中，引起周围虹膜的附着，*终阻止房水的流出和长期的眼内压。突变和神经节细胞凋亡（可引起抬高）与开角型青光眼的病理变化更为一致。