大鼠模型,动物模型 中国实验动物信息网 2020-07-29 1585

　　目的：使用氯化锂-毛果芸香碱制备Wistar大鼠癫痫模型，并研究毛果芸香碱的适当剂量和用法。方法：给Wistar大鼠腹膜内注射3 mmol/kg氯化锂，并于24小时后腹膜内注射不同剂量的毛果芸香碱。结果：40 mg/kg和30 mg/kg单次注射组的持续性大癫痫（SE）发生率和死亡率为100％，而慢性复发性癫痫（SRS）模型的成功率为0％，在30 mg/kg点，三个注射组的SE发生率为28％，死亡率为10％，SRS的成功率为18％； 25 mg/kg 3注射组的SE发生率为10％。 ，死亡率为0％，SRS成功率为10％。结论：氯化锂-毛果芸香碱可用于制备Wistar大鼠癫痫模型。卢卡平的剂量应为25-30 mg/kg。分流进样方法优于单次进样方法。

　　癫痫病是一种常见的疾病。癫痫病是不可预测的，癫痫发作的程度无法人为控制，使研究变得困难。因此，建立实验性动物癫痫模型，研究癫痫的机理，筛选和评价抗癫痫药的作用非常重要。

　　有许多方法可以制备动物癫痫模型。文献报道，由氯化锂-毛果芸香碱注射引起的大鼠癫痫持续状态（SE）达到1小时，幸存者具有自发性癫痫（SRS）模型[1、2]，这种癫痫模型类似于成人癫痫*常见的类型，颞叶癫痫，具有易于使用，可重复性高和外部干扰低的优点。在此实验中，我们使用氯化锂-毛果芸香碱创建了Wistar大鼠癫痫模型，并描述了毛果芸香碱的具体剂量和用法。  1材料与方法1.1 实验动物和一组健康的雌性Wistar大鼠（体重210-260克）购自中国医学科学院实验动物繁育中心，在室温和自然光线下提供充足的食物和水。它是40 mg/kg单次注射组（6），40 mg/kg单次注射组（4），30 mg/kg单次注射组（5），30 mg/kg取决于毛果芸香碱的注射剂量注射组分为3次（50只动物），25mg/kg 3次注射组（10只动物）。 1.2建立癫痫模型实验前24小时，所有大鼠腹膜内注射3 mmol/kg氯化锂（浓度1.5 mol/L）[3]。二十四小时后，腹膜内注射不同剂量的毛果芸香碱（浓度为0.1％）。在分开注射组中，每次注射时间间隔为10分钟[4]。持续性癫痫发作（SE）持续1小时的患者将通过腹膜内注射地西epa 10 mg/kg停药[2]。

　　2结果

　　2.1每个剂量组的不同性能统计数据所有大鼠在首次注射毛果芸香碱后5-10分钟出现胆碱能性周围神经刺激症状：直立的头发，流涎，血尿。并表现为不同程度，包括：缺乏运动，凝视，口中自动，点头，眨眼和狗状潮湿； 33只大鼠短暂史诗癫痫发作：短暂性癫痫发作表现为勃起，前肢和头部的纤维丛，在*次注射后30分钟下降，每次持续30至45秒，然后每2至5分钟。我又发作了。 30只大鼠发生持续性癫痫（1小时）。癫痫发作相同； 20只大鼠在持续性大发作后1-2天死亡； SE发作后的所有10名幸存者在20-60天内出现自发性发作。但是，每次摇摆，咬合和凝视之类的动作持续几秒钟到几十秒钟。

　　25mg/kg3注射组和30mg/kg3注射组SRS成功率的统计分析（统计方法为χ2检验，χ2= 0.38）：P\→ 0.05、即两种方法之间的统计学差异没有区别。

　　以上结果表明，Wistar大鼠癫痫模型是由氯化锂-毛果芸香碱制成的，毛果芸香碱的总量为25-30 mg/kg，40 mg/kg的剂量可引起SE，但会导致死亡表示有。非常高；如果总剂量为30 mg/kg，则单次注射的死亡率较高，因此应分次注射。可以根据不同的鼠标性能按比例缩放它，以适应不同的个体差异。

　　3讨论

　　腹腔注射氯化锂-毛果芸香碱建立的Wistar大鼠癫痫模型具有Racine描述的五种行为水平[5]。也就是说，嘴和脸抽筋； II头对头部的运动； III前肢的鼻nu； IV阵挛性勃起； V失去姿势控制能力（跌倒）。其中，I-III行为代表复杂的部分性发作，IV-V行为代表继发的全身性发作。该模型通常模拟人类癫痫，扩散和形成的整个过程。这是唯一与*常见的成人癫痫，颞叶癫痫相匹配的动物模型。 [6]：易于操作，重复性好，是研究癫痫发展和形成机制的理想模型。据报道，在使用

　　氯化锂-吡鲁卡平制备Wistar大鼠癫痫模型时，单次注射30 mg/kg毛果芸香碱可导致70％的大鼠发生SE，但SE持续90分钟，但以钡结束。死亡率仍然是45％。分批注射30 mg/kg毛果芸香碱，发作后死亡率降至10％以下。反复小剂量注射后，SRS的发生率高于单次大剂量注射[7]，因此小剂量分次注射方法优于大剂量单次注射。该实验的结果与文献报道的一致。与文献报道相比，该实验中的癫痫模型具有较低的成功率和较高的死亡率。可能的原因是该实验全部为雌性大鼠，文献中多数为雄性大鼠[1,2,6]，且性别不同。大鼠对毛果芸香碱的敏感性不同；据文献报道，激动神经元在大鼠生命的第二周开始起作用，乙酰转移酶在四周内达到大鼠的83％。钙蛋白酶对癫痫的敏感性与年龄有关[8]。当小鼠三周大时，死亡率*高，成年大鼠死亡率降低。本实验中使用的成年大鼠是成年大鼠，但优于文献报道的成年大鼠。稍小（上述实验小鼠的体重为210-260g，大部分文献为250-300g），这可能是原因之一。阿托品可能拮抗毛果芸香碱引起的癫痫病和对脑组织的损害。在该实验中未给予阿托品。