有关检测实验动物中微生物和寄生虫的具体方法,请参阅“国家标准实验动物微生物测试方法”(GB/T14926.1?14926.64)和“国家标准实验动物寄生虫测试方法”(GB/T14926.1?14926.64)。在致病性检测和血清学检测中概述了检测方法。细菌,真菌和寄生虫主要通过病原体检测,并通过血清学检测进行补充,但是某些病原体,例如支原体,Tizer病原体和弓形体,可以通过血清学方法逐步检测。病毒的常规和常规检测主要是血清学,疾病的诊断主要是病原体检测。
1.监测项目的选择
经过十多年对不同地区实验动物致病性微生物和寄生虫感染的研究,中国结合其他国家的法规和经验,目睹了牙齿,兔子,我配制了一条狗。根据猴子和鸡的微生物学和寄生虫学等级标准,所有地区和单位都可以根据当地实验室动物病原体的流行情况实施监测或选择其他项目。 2.样本数量可以根据国家标准确定样本动物的数量,而健康动物群体的样本数量则取决于生产和繁殖单位的规模(表2-10)。
3.测试频率
国家标准(GB14922.1、GB14922.2)规定了不同水平的实验动物的测试频率。至少每3个月对正常等级的动物,干净等级的动物和具有亚特异病原体的动物进行测试。每年对无菌动物进行一次测试,每2至4周对动物的生活环境和粪便样本进行一次测试。一般而言,当病原体入侵动物种群以引起感染时,它促进了病原体的早期分离并随后提高了抗体的检测率。几个月后,这可能是由于某些个体的抗体水平降低和未感染的新生儿数量增加所致。由于其他原因,抗体的检测率降低了。
4.采样方法
可以使用随机采样方法或定点动物方法。当采用随机抽样进行抽样时,建议从动物组的不同位置随机选择育种者,并至少选择4个不同的位置来收集样品。在哨兵法中,将经过测试后符合质量要求的相同品系的实验动物即哨兵动物放入社区,不时重新排列,养育一段时间,然后解剖以检查抗体和病原体。从采样点将采样的样本运输到实验室时,必须确保动物的安全和避免污染。一般而言,无论致病性或血清学如何,阳性测试结果均表明一组动物感染了病原体。但是,作为疾病的病原体,需要进一步的分析。如果检测结果为阴性,通常可将其作为不存在病原体的依据。但是,测试结果也受许多因素影响。示例:采集的样本数量,感染率水平,采集的频率,目标选择(例如动物年龄,早期或晚期疾病)方法选择(致病性或血清学检测),方法敏感性与检测结果密切相关 5.病毒检测方法 (1)血清学检测:适用于各种水平和类型的实验室动物的定期检查和流行病监测我会。常用的方法是酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫荧光。测试。 FA),免疫酶染色试验(IEA),血凝试验(HA),血凝抑制试验(HI),病毒中和试验,补体固定试验,琼脂扩散试验等。 (2)致病性测试:适用于一组动物患病且需要检测或确认病毒的情况。检测方法包括病毒分离和鉴定,病毒颗粒,抗原或核酸的检测,潜在的病毒激活以及抗体生产测试。示例:使用免疫组织化学方法在光学显微镜下检测患病组织中的特定抗原; HA或HI方法检测粪便或患病动物组织悬液中的血凝素抗原;电子使用显微镜或免疫电子显微镜技术检测组织或排泄物中的病毒颗粒;聚丙烯凝胶电泳(PAGE)用于检查病毒蛋白;检测组织或排泄物中的病毒核酸使用了核酸分子杂交技术或聚合酶链反应(PCR)。
6.细菌检测方法
*常用的方法是分离和培养病原体或接种动物。一些病原体,例如布鲁氏菌和支原体,可以采用血清学方法。泰泽病原体不能在人工培养基中生长,因此建议使用血清学检测方法,动物诱导实验,组织压缩,显微镜检查并根据病理检查结果做出*终诊断。我会。
7.真菌检测方法
目前主要使用Sabouraud培养基进行分离和培养。皮肤癣菌通常在25°C下培养,深真菌通常在37°C下培养。各种真菌具有特定的菌落特征,可与显微镜染色结合使用以鉴定物种。同样,生化反应和免疫学方法的结果可能需要用于*终诊断。
8.寄生虫的检测方法
(1)体外寄生虫:肉眼观察,透明胶带粘贴,驱除性采样,头皮屑采样,黑色背景检查,解剖显微镜下的常规检查等。 ,它主要适用于检查跳蚤,虱子,骗子和其他节肢动物。
(2)内部寄生虫:主要是直接涂片法(粪便,血液,器官,肠内容物),饱和盐水悬浮法或沉淀法,使用玻璃纸在胚盘,昆虫和原生动物周围检查动物组织或器官轮廓压纹,患病的组织切片或压片,尿液离心(例如检测膀胱线虫)。