动物实验,DNA重组 中国实验动物信息网 2020-08-26 2065

     大多数研究人员使用Cre-LoxP重组酶系统技术从基因组中敲除目标基因的序列，或将基因插入基因组。近年来，使用化合物和光控制Cre-LoxP重组酶系统的技术受到越来越多的关注。特别是，如果可以将光用于控制Cre-LoxP重组酶系统，它将瞄准特定的生物组织和细胞，以随时诱导DNA重组。然而，当现有技术使用光进行控制时，DNA重组的效率大大降低。这也是一个困扰着研究人员的大问题。

　　在这项研究中，我们成功开发了一种光激活的Cre重组酶，该酶可使团队成员将暂时失活的DNA重组酶（Cre）连接至光开关蛋白，并使用光来控制DNA重组反应。做到了。该酶被称为“ PA-Cre”。 PA-Cre可以照射弱光（光遗传学中通常使用的光强度的100,000倍）来实现DNA重组，效率极高。大约30秒的短时间足以诱导DNA重组。此外，研究人员已成功地使用PA-Cre在选定的靶位点进行DNA重组。

　　基于此，研究人员使用PA-Cre光学控制小鼠深层体内的遗传基因。实验表明，使用非侵入性方法从体外照射光，即使在小鼠体内深处的肝脏中，也可以高效诱导DNA重组。研究人员已经表明，该结果可以通过无创光照射在体内控制基因活性。这对于发现与疾病相关的基因功能非常重要。