动物造模 中国实验动物信息网 2024-03-01 1826

　　目的 研究成年树鼩睾丸中维生素D代谢酶和维生素D受体的转录水平,检测 CYP24A1 的蛋白表 达,探索雄性实验树鼩生殖障碍的原因。

　　方法 选择 2~ 3 岁雄性树鼩,根据个体繁殖档案分为具有成功生育史的 正常组,和无生育史的生殖障碍组,每组各 5 只。 手术摘取一侧睾丸,通过病理学观察其组织病理变化;采用实时 荧光定量 PCR 检测睾丸组织中维生素 D 受体、维生素 D 代谢酶 mRNA 水平的变化,以蛋白印迹法检测 CYP24A1 的蛋白表达,同时用免疫荧光观察精子 CYP24A1 表达情况。

　　结果 正常组与生殖障碍组相比曲细精管排列更紧密,生精细胞更多。 与正常组相比,生殖障碍组树鼩睾丸组织 VDR、CYP2R1、CYP27A1 mRNA 水平无明显差异(P> 0. 05),而 CYP24A1 在 mRNA 表达水平和蛋白水平都明显低于正常组(P<0. 05)。 同时免疫荧光结果显示正常组睾丸来源的精子在其头部、颈部和中段的 CYP24A1 蛋白高表达,而生殖障碍组表现为低表达或不表达。

　　结论 CYP24A1 与雄性树鼩成功生育有直接联系,提示 CYP24A1 可以作为判断雄性树鼩生育力的重要指标。