动物造模 中国实验动物信息网 2021-07-08 1959

　　目的：探讨ripply1基因在斑马鱼早期背腹轴发育中的作用。

　　方法：利用斑马鱼全包囊原位杂交技术，揭示了斑马鱼早期胚胎发育中ripply1基因的表达模式，并利用显微注射技术在胚胎1细胞期产生ripply1 mRNA，注入高表达Ripply1蛋白.观察阶段胚胎背腹标记基因的变化和胚胎的形态变化。使用Tol2转基因技术，我们构建了由ribply1启动子驱动的GFP转基因鱼。

　　结果：原位杂交结果表明，ribply1基因在斑马鱼胃的早期胚盾阶段，即给定背部的胚盾中特异表达。ipply1高表达后，胚盾期后标记基因表达范围扩大，腹部标记基因表达减弱。受精后二十四小时，胚胎表现出严重的背侧表型：头部增大，腹部卵黄延伸减弱，尾躯干和尾部增大，面积缩小，第二个体有的甚至形成轴。由此产生的转基因鱼揭示了ipply1 的母体表达，由转录起始位点上游 1200 个碱基驱动的 GFP 可以模拟内源基因的表达模式。

　　结论：Ripply1可能参与了斑马鱼胚胎早期背腹轴的发育。