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【动物实验】-miR-424对非小细胞肺癌细胞株A549迁移及侵袭的影响

  目的:探讨miR-424对非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响。

  方法:检测肺癌细胞NCI-H460,NCI-H1975、NCI-H446、A549,NCI-H1299,NCI-H157和人胚肺成纤维细胞MRC-5中的miR-424和脂质表达RT-PCR方法Lipofectamine?2000将miR-424抑制剂和miR-424NC转移至A549细胞。 48小时后,RT-PCR方法检测到miR-424的表达,CCK-8方法检测到细胞的活力,刮擦测试检测到的细胞迁移能力,Transwell测试检测到的细胞侵袭能力, Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP2),MMP9,转化生长因子β1(TGF-β1)和p-Smad3的表达。

  结果:肺癌细胞中的miR-424CI-H460,NCI-H1975、NCI-H446、A549,NCI-H1299,NCI-H157((1.78±0.13),(1.69±0.10),(1.89±0.18)) ,(2.88±0.27),(2.52±0.20),(2.49±0.23)] miR-424表达水平是人胚胎肺成纤维细胞MRC-5中的(0.58±0.05)miR-424表达水平。显着高于该值(P \u003c0.01)。与miR-424NC组相比,miR-424抑制剂组的miR-424表达显着降低(P\u003c0.01),细胞活力降低(P\u003c0.01),细胞迁移和侵袭能力降低(P≥0.01),并且MMP2、MMP9,TGF-β1和p-Smad3的表达水平显着下调(P≥0.01)。

  结论:miR-424的下调可以通过抑制TGF-β1/ Smad3信号通路来抑制A549细胞的迁移和侵袭。

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